眾所周知,高級3D成像經(jīng)常應(yīng)用于醫(yī)療領(lǐng)域中,以研究人體內(nèi)部結(jié)構(gòu)的應(yīng)用,證明基因是否會影響人類的面部外觀,甚至提供較早的乳腺癌檢測。最近,美國國家衛(wèi)生研究院(NIH)的國家過敏和傳染病研究所(NIAID)的一個(gè)研究小組一直在努力開發(fā)一種被稱為Ce3D的技術(shù)。據(jù)悉,該技術(shù)能夠可視化分布在如腫瘤等復(fù)雜組織中的細(xì)胞類型。
化學(xué)組織清除技術(shù)被醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室和研究人員使用,使密集不透明的組織透明,當(dāng)他們需要組織樣本時(shí),特別是腫瘤細(xì)胞的詳細(xì)圖像,科學(xué)家使用最先進(jìn)的顯微鏡來識別和找出某些細(xì)胞可能是癌性的,并且使用易于觀察的抗體或熒光化合物來標(biāo)記。然而,目前的組織清除技術(shù)有限且難以使用,所以研究人員難以理解患者的免疫系統(tǒng)如何影響腫瘤。一些科學(xué)家使用組織清除以外的方法來計(jì)數(shù)組織中的細(xì)胞類型,但這些技術(shù)意味著需要切片組織樣品。
這種新的3D組織成像技術(shù)可以幫助醫(yī)學(xué)研究人員提供針對復(fù)雜癌癥評估的各種免疫療法。通過使用Ce3D,研究人員能夠?qū)⒒顧z組織保持在一塊,使用跟蹤方法來標(biāo)記許多不同的細(xì)胞類型,然后以準(zhǔn)確的觀察結(jié)果。
NIAID內(nèi)分泌研究系系統(tǒng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室主任Ronald N. Germain博士、NIAID系統(tǒng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的Weizhe Li博士、Michael Y. Gerner博士以及華盛頓大學(xué)免疫學(xué)系的Michael Y. Gerner博士,共同在美國國家科學(xué)院院刊中發(fā)表了一篇題為“使用清除增強(qiáng)3D顯微鏡(Ce3D)對大組織進(jìn)行多重定量細(xì)胞分析”的研究報(bào)告。
該研究報(bào)告的摘要如下:“器官平衡,細(xì)胞分化,信號傳導(dǎo)和原位功能都取決于細(xì)胞在復(fù)雜組織中的空間組織。因此,在宏觀組織結(jié)構(gòu)的背景下,細(xì)胞定位、表型識別和功能狀態(tài)的全面、高分辨率測繪對于更深入地了解多種生物過程至關(guān)重要。在這里,我們報(bào)告一種易于使用的方法,清除增強(qiáng)3D(Ce3D),其為大多數(shù)器官產(chǎn)生優(yōu)異的組織透明度,保留細(xì)胞形態(tài)和蛋白質(zhì)熒光,并且與基于免疫標(biāo)記的抗體相容。這種增強(qiáng)的信號質(zhì)量和廣泛探針復(fù)用的能力允許通過3D組織細(xì)胞計(jì)量對完整的Ce3D處理的組織中不同的高度混合的細(xì)胞群進(jìn)行定量分析。我們使用這種技術(shù)的大容量、高分辨率顯微鏡來展示淋巴組織和非淋巴器官中的不同細(xì)胞類型,以及對淋巴組織中多種細(xì)胞群體的組成和組織分布進(jìn)行定量分析。結(jié)合組織細(xì)胞術(shù),Ce3D提供了體積定量成像和分析的綜合策略,彌補(bǔ)了常規(guī)剖面成像和基于解離技術(shù)之間的差距?!?/span>
為了找到Ce3D方法的正確組合,研究團(tuán)隊(duì)使用小鼠的淋巴組織篩選不同的試劑,因?yàn)榻M織的細(xì)節(jié)和復(fù)雜程度足以使研究人員準(zhǔn)確地解釋該組織如何對服藥和免疫治療進(jìn)行反應(yīng)。
一旦有適當(dāng)?shù)慕M合,他們測試了從腸、肝、肺、肌肉和胸腺組織的方法,并能夠得到每個(gè)詳細(xì)、全面的3D圖像。
醫(yī)療領(lǐng)域,特別是在癌癥增長方面,越來越頻繁地轉(zhuǎn)向針對個(gè)體腫瘤的反應(yīng)。NIAID的新型Ce3D方法對于正在評估實(shí)驗(yàn)室治療的醫(yī)師以及評估實(shí)際病人的醫(yī)生來說可能是非常重要的,因?yàn)樗抢靡环N非常復(fù)雜的技術(shù)來獲取有關(guān)腫瘤的詳細(xì)信息。此外,該技術(shù)比組織清除方法更具可擴(kuò)展性和成本效益,因?yàn)樗褂矛F(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)室儀器和較便宜的物質(zhì)。
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